УДК  (616.33-008.17-031:611.329)-07:616-008.921.4)-074

Андреянова Н.Н., Тарасова Г.Н.

ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ КОМПОНЕНТОВ СИСТЕМЫ ОКСИДА АЗОТА ПРИ ГАСТРОЭЗОФАГЕАЛЬНОЙ РЕФЛЮКСНОЙ БОЛЕЗНИ

ГОУ ВПО Ростовский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России

В данной статье рассматривается патогенетические механизмы влияния компонентов системы оксид азота при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни в разные фазы заболевания.

Ключевые слова: гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь, оксид азота, нитрооксидсинтетаза.

This article discusses the pathogenic mechanisms of the components of the system nitric oxide with gastroesophageal reflux disease in different phases of the disease.

Key words: gastroesophageal reflux disease, nitric oxide, nitric oxide synthase

Гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (ГЭРБ) остается одной из приоритетных проблем не только для гастроэнтерологии, но и для клинической медицины в целом. Это определяется ее распространенностью, возможностью существования внепищеводных проявлений заболевания, серьезными осложнениями, а также недостаточной эффективностью существующих методов лечения. По современным представлениям, ГЭРБ рассматривается, как заболевание с первичным нарушением моторики пищевода и желудка. Ведущее место в его патогенезе занимает нарушение функции антирефлюксного барьера, которое может возникать вследствие первичного снижения тонуса нижнего пищеводного сфинктера (НПС), его структурных изменений, увеличения числа спонтанных расслаблений, а также снижения химического и объемного эзофагеального клиренса. Другими патогенетическими факторами ГЭРБ являются повреждающие свойства рефлюксата, а также снижение резистентности слизистой оболочки пищевода (СОП), которая обусловлена предэпителиальными, эпителиальными и постэпителиальными уровнями. Одним из важных условий рецидивирования ГЭРБ являются сложные нарушения моторики пищевода, в частности его нижнего сфинктера. В патогенезе двигательных нарушений одну из основных ролей может играть изменение метаболизма оксида азота (NO) [1, 2, 3, 4]. Особый интерес в этой связи приобретают работы, посвященные изучению особенностей продукции NO и его метаболитов у больных с ГЭРБ [2, 4, 5, 6]. В исследованиях установлено, что расслабление пищевода и НПС осуществляется за счет неадренергической нехолинергической иннервации (NANC), где NO - главный медиатор, высвобождающийся из NANC нейронов межмышечного сплетения [9, 10]. Стимуляция нейронов сопровождается увеличением активности нитрооксидсинтазы (NOS) и выделением NO. Проникнув в мышечные слои, NO связывается с гемовой группой фермента гуанилатциклазы, ответственной за синтез вторичного мессенджера - циклического гуанозин 3,5-монофосфата (цГМФ). Активность гладкомышечных клеток прямо пропорциональна концентрации цитозольного кальция [1], а увеличение его уровня способствует соединению нитей актина и миозина, что обеспечивает сокращение мышечного волокна, а активация же гуанилатциклазы приводит к увеличению содержания цГМФ, который снижает уровень внутриклеточного кальция и тем самым способствует расслаблению НПС [4]. В исследовании, посвященном оценке роли NO в регуляции моторики пищевода, получены данные, что у пациентов с ГЭРБ изменяется уровень NO в виде повышения концентрации его метаболитов (NO_Х). При этом была выявлена зависимость между продукцией NO_Х и длительностью болезни, что свидетельствует о патогенетической значимости этого биологически активного вещества в развитии и прогрессировании ГЭРБ [3]. В этой связи целесообразным является дальнейшее изучение влияния продукции NO_Х на патогенетические механизмы развития и хронизации ГЭРБ.

С целью изучения патогенетического влияния продукции компонентов системы NO на течение ГЭРБ проведено открытое сравнительное исследование, в котором приняли участие 162 больных с разными градациями ГЭРБ. На основании классификационных критериев, больные были разделены на 4 группы, сопоставимые по основным клинико-функциональным показателям. Группа контроля состояла из 16 добровольцев (6 женщин и 10 мужчин), в возрасте 18-40 лет (средний возраст 24,7+6,4 лет), при комплексном обследовании которых патологии внутренних органов не выявлено. 83 (51,2%) больным с разными градациями ГЭРБ и 16 пациентам контрольной группы проводилось определение в разных биологических средах (сыворотке крови (СК), гомогенате биоптатов СОП) концентрации NO_Х и активности NOS.  Определение оксида азота в СК и СОП проводили с помощью классической реакции Грисса по содержанию его метаболитов (NO^-₂, NO^-₃), после энзиматического восстановления нитратов в нитриты, обозначаемых в литературе NO_Х. Для осуществления реакции использовали коммерческие наборы реактивов (Cayman`s Nitrate / Nitrite Assay Kit, Cayman Chemical Co., Ann Arbor, MI, USA). Активность нитрооксидсинтазы (NOS) оценивали по увеличению продукции оксида азота из L–аргинина в присутствии НАДФ-Н.

Во всех группах больных было констатировано увеличение концентрации NO_Х в СК по сравнению с группой контроля, которое колебалось в широких пределах: от максимального уровня при ГЭРБ D и ГЭРБ В (57,2+19,1 пг/мл и 48,8+4,0пг/мл, p<0,05) до минимальных значений при ГЭРБ А и С  (30,4+8,23пг/мл и 32,4+3,13пг/мл, p>0,05). Аналогичная динамика изменений была зарегистрированы  при определении NO_Х в СОП (табл. 1).  При оценке активности NOS была выявлены тождественные изменения с максимальным увеличением активности  NOS в СК и СОП у больных с ГЭРБ D: 63,1+5,7 мкмоль/л  и 38,3+4,4 мкг/г соответственно (p<0,05). В остальных исследовательских группах отмечено наличие тенденции к увеличению активности NOS у больных с выраженными воспалительными изменениями СОП (табл. 2).

Таблица 1

Концентрация метаболитов оксида азота  в биологических средах у больных с разными градациями гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, М + SD

* Примечание: значимость различий (p<0,05) при сравнении с показателями контрольной группы.

Таблица 2

Активность нитрооксидсинтазы в биологических средах у больных с разными градациями гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, М + SD

* Примечание: значимость различий (p<0,05) при сравнении с показателями

Статистически значимое повышение концентрации NO_Х и активности NOS в разных биологических средах у больных с ГЭРБ градации D и C можно объяснить объемом и площадью деструкции и выраженностью воспалительных изменений СО пищевода. При проведении ранговой корреляции Спирмена выявлена прямая зависимость между концентрацией NO_Х, активностью NOS в СК и СОП, длительностью заболевания и степенью деструктивных изменений СОП: r=0,45, р=0,01; r=0,64, р=0,001; r=0,58,  р=0,003; r=0,61, р=0,005 соответственно.

Таким образом, выявленные изменения продукции NO у больных ГЭРБ позволяют предположить наличие регуляторного дисбаланса в системе образования и утилизации NO в организме, что закономерно сопровождается дисфункцией НПС и прогрессированием воспалительных изменений СОП. Наличие корреляционных связей между показателями метаболизма NO и параметрами заболевания позволяет предположить наличие патогенетической роли компонентов системы NO в развитии и прогрессировании ГЭРБ.

Литература:

1.  Голиков П.П. Оксид азота в клинике неотложных состояний. - М.: Медпрактика, 2004. - С. 6-19

2.  Ивашкин В. Т., Драпкина О.М. Оксид азота в регуляции функциональной активности физиологических систем // Росс. журн. гастро., гепатол., колопроктол. - 2000. - том 10, №4. - С. 16-21

3.  Лазебник Л.Б., Дроздов В.Н., Барышников Е.Н. Роль оксида азота в этиопатогенезе некоторых заболеваний органов пищеварения // Экспер. и клин. гастроэнтерол. - 2005. - № 2. - С. 2-11

4.  Малышев И.Ю. Введение в биохимию окиси азота // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 1997. - Т. 7, № 1. - С. 49-55

5.  Маев В., Трухманов А.С., Малышев И.Ю., Черемушкина Н.В. Исследование метаболизма оксида азота при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни // Клин. перспект. гастроэнтерол., гепатол. - 2007. -№6. - С. 11-16

6.  Чепур С.В., Стариков В.Н., Саблин О.А. Подходы к клинической оценке состояния нитроксидергической системы у больных гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью // Экспер. и клин. гастроэнтерол. - 2003. - № 1. - С. 116

7.  Koek G.H., Tack J., Sifrim D. et al. The role of acid and duodenal gastroesophageal reflux in symptomatic GERD // Am. J. Gastroenterol. - 2001. - Vol. 96. - N 7. - P. 2033–2040

8.  Konturek J.W., Thor P., Lukashyk A. et al. Endogenous nitric oxide in the control of esophageal motility in humans // J. Physiol. Pharmacol. - 1997.- Vol. 131. -  N 2. - Р. 201-209

9.  Tomita R., Kurosu Y., Munakata K. Relationship between nitric oxide and non-adrenergic non-cholinergic inhibitory nerves in human lower esophageal sphincter // J. Gastroenterol. - 1996. - Vol. 91. - N 1. - Р. 65-74

10.  Tanahashi T. Pathophysiological significance of neuronal nitric oxide synthase in the gastrointestinal tract // J. Gastroenterol. -  2003. - Vol. 38. - N 5. - Р. 421-430